Geleitwort | 5 |
Vorwort | 7 |
Inhaltsverzeichnis | 9 |
Aufgaben der histologischen Technik / Pathologie | 10 |
Ablauf in einem modernen, histodiagnostischen Labor | 12 |
Biochemie | 15 |
A. Aufbau der Zelle | 16 |
1. Schematische Darstellung einer Epithelzelle | 16 |
2. Zellkern (Nukleus) | 17 |
3. Nukleolus | 17 |
4. Cytoplasma | 17 |
5. Endoplasmatisches Reticulum (ER) | 17 |
6. Ribosomen | 18 |
7. Mitchondrien | 18 |
8. Lysosome | 18 |
9. Golgi-Apparat | 18 |
10. Zentriol | 19 |
11. Paraplasma | 19 |
12. Zellmembran | 19 |
13. Mikrovilli | 19 |
14. Gewebe | 20 |
15. Interzellular-Substanz | 20 |
B. Bausteine | 20 |
1. Wasser | 20 |
2. Salze | 21 |
3. Proteine | 21 |
3.1. Aminosäuren | 22 |
3.2. Proteinstruktur | 23 |
3.3. Hydratation | 24 |
3.4. Denaturierung | 24 |
3.5. Proteide | 24 |
3.6. Enzyme | 25 |
4. Kohlenhydrate | 26 |
4.1. Einfachzucker | 27 |
4.2. Zweifachzucker | 27 |
4.3. Mehrfachzucker | 27 |
4.3.1. Glykogen | 28 |
4.3.2. Glykokonjugate (Schleimstoffe) | 28 |
4.3.3. Glykokalix | 31 |
4.3.4. Basalmembran | 31 |
5. Lipide | 31 |
5.1. Triglyceride | 32 |
5.2. Lipoide | 33 |
5.2.1. Phosphatide | 33 |
5.2.2. Ganglioside | 33 |
5.2.3. Sphingolipide | 33 |
5.2.4. Steroide | 33 |
6. Nukleinsäuren | 34 |
C. Zusammenfassung | 35 |
Untersuchungsmaterial | 36 |
A. Gewinnungsart | 37 |
B. Vorbehandlung | 39 |
1. Fixiertes Gewebe | 39 |
2. Natives, unfixiertes Material | 39 |
2.1. Intraoperative Schnellschnittuntersuchung | 40 |
2.2. Natives Material zur direkten mikroskopischen Untersuchung | 41 |
2.3. Zellsuspensionen (Punktionen) | 42 |
C. Vitalzustand | 42 |
1. Tote Zellen, totes Gewebe | 42 |
2. Lebende Zellen | 42 |
D. Einsenderichtlinien | 43 |
E. Faktoren der Vorbehandlung | 44 |
1. Anmeldung im Labor für spezielle Fragestellungen – Ansprechpartner | 44 |
2. Untersuchungsart – fixiert, nativ | 44 |
3. Gewünschte Vorbehandlung | 44 |
4. Art des Fixiermittels – Formalin, Alkohol, Glutaraldehyd | 44 |
5. Menge des Fixiermittels – Einsendegefäße | 44 |
6. Identifikation der Probe – Etiketten, Einsendeschein | 45 |
7. Information zu Klinik und Operation, Orientierung – Einsendeschein | 45 |
F. Sonstiges Probenmaterial | 46 |
1. Obduktionen | 46 |
2. Probenmaterial von Tieren | 47 |
3. Probenmaterial von Pflanzen | 47 |
Fixierung | 48 |
A. Allgemeines | 49 |
B. Fixierung der Gewebe-Bausteine | 52 |
C. Fixiermittel | 54 |
D. Andere Formen der Fixierung | 71 |
Verarbeitung von hartem Gewebe | 75 |
A. Dekalzifikation – Entkalkung | 77 |
1. Entkalkung durch Säure | 77 |
2. Entkalkung durch Chelatbildung | 78 |
3. Prüfung der Entkalkung | 80 |
5. Beschleunigung der Entkalkung | 81 |
8. Schneiden | 82 |
9. Oberflächenentkalken | 82 |
10. Färbung entkalkter Proben | 82 |
11. Untersuchungsmaterial im Histodiagnostiklabor | 83 |
B. Mazeration | 84 |
C. Hartschnitttechnik – Hartschlifftechnik | 85 |
1. Geräte zur Präparatherstellung | 85 |
2. Beispiele für Knochenverarbeitung | 86 |
3. Färbungen an unentkalkten Schliffpräparaten | 87 |
3.1. Toluidinblau-Färbung | 87 |
3.2. Masson-Goldner-Trichromfärbung (Bindegewebsfärbung) | 87 |
3.3. von Kossa - Färbung | 87 |
3.4. Färbung nach Giemsa | 88 |
3.5. Hämatoxylin-Eosin-Färbung | 88 |
4. Färbungen an Methacrylatschnitten von unentkalkten Knochenbiopsien | 88 |
5. Fluoreszenz-Markierung in Knochen | 88 |
6. Autoradiografie | 89 |
7. Kontaktradiografie | 89 |
8. Histomorphometrische Methoden am unentkalkten Knochen | 89 |
D Makroskopische Begutachtung – Vom Fläschchen in die Kassette | 91 |
Einbettungsprozess | 95 |
A. Paraffinwachseinbettung | 97 |
1. Nachbehandlung nach Formalin-Fixierung | 97 |
2. Beispiel eines Einbettungsprotokolls | 97 |
3. Faktoren des Einbettungsprozesses | 98 |
3.1. Prinzip | 98 |
3.2. Gewebe | 98 |
3.3. Reagenzien | 98 |
3.4. Prozessbedingungen | 99 |
4. Arbeitsschritte | 100 |
5. Automation | 103 |
6. Ausgießen, Einblocken (Embedding) | 106 |
7. Tissuearray (Multigewebeblock) | 109 |
B. Gelatine-Einbettung | 111 |
C. Agar-Einbettung | 112 |
D. Celloidin-Einbettung (Nitrocellulose) | 113 |
E. Polyethylenglykol-Einbettung (PEG) | 114 |
F. Polyesterwachs-Einbettung | 115 |
G. Kunststoff-Einbettung | 116 |
H. Übersicht - Processing-Reagenzien | 128 |
Mikrotomie | 132 |
A. Einbettmedien - Schnittdicken | 133 |
B. Mikrotom | 134 |
C. Mikrotommesser | 141 |
D. Schneidetechnik | 146 |
E. Anhaften der Schnitte am Objektträger | 161 |
F. Laser Capture Microdissection (LCM) | 166 |
Histologische Färbung | 168 |
A. Geschichtliches | 170 |
B. Farbstoffe | 171 |
C. Färbetheorie | 179 |
D. Vorbehandlung | 188 |
E. Färbeprotokolle | 189 |
F. Übersichtsfärbung: Hämatoxylin – Eosin – Färbung | 192 |
G. Spezialfärbungen | 198 |
H. Bindegewebe- und Stützgewebe-Darstellung | 204 |
K. Amyloid-Darstellung | 222 |
M. Mikroorganismen-Darstellung | 230 |
N. Darstellung neurologischer Strukturen | 233 |
O. Nukleinsäuren-Darstellung | 236 |
P. Darstellung von biogenen Aminen | 237 |
Q. Darstellung funktioneller Gruppen | 238 |
S. Nachbehandlung der Schnitte | 239 |
T. Färbeautomaten | 242 |
U. Färbung in der Elektronenmikroskopie | 244 |
Enzymhistochemie | 246 |
A. Enzyme | 247 |
B. Indikationen | 248 |
C. Fixierung | 248 |
D. Nachweisprinzip | 249 |
E. Phosphatasen | 253 |
F. Esterasen | 255 |
G. Oxidoreductasen | 258 |
Immunhistochemie | 266 |
A. Prinzip | 267 |
B. Anwendung der Immunhistochemie | 268 |
C. Antikörper | 269 |
D. Begriffe | 277 |
E. Fixierung, Processing, Schneiden in der Immunhistologie | 279 |
F. Antigen-Demaskierung | 281 |
G. Methoden | 284 |
H. Amplifikationsmethoden | 292 |
K. Bearbeitung von zytologischem Material und Gefrierschnitten | 299 |
L. Protokoll-Beispiel für LSAB-Methode | 300 |
M. Automation | 301 |
In Situ Hybridisierung | 304 |
A. Anwendungen | 305 |
B. Prinzip | 307 |
C. Ablauf | 311 |
D. Automation | 318 |
E. In-situ-PCR | 319 |
F. Extraktion von Nukleinsäuren aus fixiertem Gewebe | 319 |
G. Microarrays | 321 |
H. Begriffe | 324 |
Zellkultur | 328 |
A. Technik | 329 |
B. Anwendungsbeispiele | 337 |
C. Gewebe- und Organkulturen | 339 |
D. Begriffe | 340 |
Mikrowellentechnik | 342 |
A. Mikrowellen-Physik | 343 |
B. Faktoren der Energieaufnahme | 344 |
D. Mikrowellenherde | 346 |
E. Praktisches Arbeiten mit Mikrowellen | 348 |
F. Anwendungen | 349 |
Mikroskopie | 353 |
A. Hellfeldmikroskop | 354 |
B. Dunkelfeldmikroskop | 355 |
C. Phasenkontrastmikroskop | 355 |
D. Interferenzkontrastmikroskop | 355 |
E. Polarisationsmikroskop | 356 |
F. Fluoreszenzmikroskop | 356 |
G. Konfokales Raster-Lasermikroskop | 356 |
H. Stereomikroskop | 357 |
I. Elektronenmikroskop | 357 |
J. Digitale Bildgebung | 361 |
Qualitätssicherung im Labor | 363 |
A. Projekt | 364 |
B. Produkt | 367 |
C. Prozesse | 369 |
D. Projektteam | 370 |
E. Dokumente | 373 |
F. Faktor Mensch | 374 |
G. Begriffe | 375 |
Sicherheit im histologischen Labor | 380 |
A. Chemische Arbeitsstoffe | 382 |
B. Biologische Arbeitsstoffe | 394 |
C. Wohlfühlfaktor am Arbeitsplatz | 396 |
D. Gesetzliche Richtlinien | 397 |
E. Aufstellung von Chemikalien im Histolabor | 399 |
Geschichte der histologischen Technik | 415 |
A. Zeittabelle | 416 |
Quellen | 423 |
Abkürzungen | 420 |
Bildnachweis | 431 |
Sachverzeichnis | 432 |