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E-Book

Histotechnik

Praxislehrbuch für die Biomedizinische Analytik

AutorGudrun Lang
VerlagSpringer-Verlag
Erscheinungsjahr2006
Seitenanzahl427 Seiten
ISBN9783211331422
FormatPDF
KopierschutzDRM
GerätePC/MAC/eReader/Tablet
Preis42,99 EUR

Dieses Buch stellt erstmals umfassend die unterschiedlichen Techniken dar, die in einem histodiagnostischen Labor angewandt werden. Neben Basisthemen wie Fixierung, Gewebeprocessing und Färbung, behandelt es praxisrelevant und ausführlich die Grundlagen von Immunhistochemie und in-situ-Hybridisierung. Zusätzlich erläutert es Qualitätssicherung und Arbeitssicherheit. Die Autorin berichtet sehr strukturiert und leicht verständlich aus ihrer langjährigen Erfahrung. Zahlreiche Abbildungen illustrieren die moderne Instrumentation im Labor. Das Praxislehrbuch deckt die Anforderungen der Fachhochschule bzw. Akademie für Biomedizinische Analytik ab.



Gudrun Lang ist Biomedizinische Analytikerin (MTA) und seit Jahren in einem Histologischen Labor in einem großen Krankenhaus tätig. Sie hat ihr fachliches Wissen und ihre Erfahrungen in diesem Buch gesammelt und gibt sie KollegInnen und BerufsanfängerInnen praxisnah weiter.

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Inhaltsverzeichnis
Geleitwort5
Vorwort7
Inhaltsverzeichnis9
Aufgaben der histologischen Technik / Pathologie10
Ablauf in einem modernen, histodiagnostischen Labor12
Biochemie15
A. Aufbau der Zelle16
1. Schematische Darstellung einer Epithelzelle16
2. Zellkern (Nukleus)17
3. Nukleolus17
4. Cytoplasma17
5. Endoplasmatisches Reticulum (ER)17
6. Ribosomen18
7. Mitchondrien18
8. Lysosome18
9. Golgi-Apparat18
10. Zentriol19
11. Paraplasma19
12. Zellmembran19
13. Mikrovilli19
14. Gewebe20
15. Interzellular-Substanz20
B. Bausteine20
1. Wasser20
2. Salze21
3. Proteine21
3.1. Aminosäuren22
3.2. Proteinstruktur23
3.3. Hydratation24
3.4. Denaturierung24
3.5. Proteide24
3.6. Enzyme25
4. Kohlenhydrate26
4.1. Einfachzucker27
4.2. Zweifachzucker27
4.3. Mehrfachzucker27
4.3.1. Glykogen28
4.3.2. Glykokonjugate (Schleimstoffe)28
4.3.3. Glykokalix31
4.3.4. Basalmembran31
5. Lipide31
5.1. Triglyceride32
5.2. Lipoide33
5.2.1. Phosphatide33
5.2.2. Ganglioside33
5.2.3. Sphingolipide33
5.2.4. Steroide33
6. Nukleinsäuren34
C. Zusammenfassung35
Untersuchungsmaterial36
A. Gewinnungsart37
B. Vorbehandlung39
1. Fixiertes Gewebe39
2. Natives, unfixiertes Material39
2.1. Intraoperative Schnellschnittuntersuchung40
2.2. Natives Material zur direkten mikroskopischen Untersuchung41
2.3. Zellsuspensionen (Punktionen)42
C. Vitalzustand42
1. Tote Zellen, totes Gewebe42
2. Lebende Zellen42
D. Einsenderichtlinien43
E. Faktoren der Vorbehandlung44
1. Anmeldung im Labor für spezielle Fragestellungen – Ansprechpartner44
2. Untersuchungsart – fixiert, nativ44
3. Gewünschte Vorbehandlung44
4. Art des Fixiermittels – Formalin, Alkohol, Glutaraldehyd44
5. Menge des Fixiermittels – Einsendegefäße44
6. Identifikation der Probe – Etiketten, Einsendeschein45
7. Information zu Klinik und Operation, Orientierung – Einsendeschein45
F. Sonstiges Probenmaterial46
1. Obduktionen46
2. Probenmaterial von Tieren47
3. Probenmaterial von Pflanzen47
Fixierung48
A. Allgemeines49
B. Fixierung der Gewebe-Bausteine52
C. Fixiermittel54
D. Andere Formen der Fixierung71
Verarbeitung von hartem Gewebe75
A. Dekalzifikation – Entkalkung77
1. Entkalkung durch Säure77
2. Entkalkung durch Chelatbildung78
3. Prüfung der Entkalkung80
5. Beschleunigung der Entkalkung81
8. Schneiden82
9. Oberflächenentkalken82
10. Färbung entkalkter Proben82
11. Untersuchungsmaterial im Histodiagnostiklabor83
B. Mazeration84
C. Hartschnitttechnik – Hartschlifftechnik85
1. Geräte zur Präparatherstellung85
2. Beispiele für Knochenverarbeitung86
3. Färbungen an unentkalkten Schliffpräparaten87
3.1. Toluidinblau-Färbung87
3.2. Masson-Goldner-Trichromfärbung (Bindegewebsfärbung)87
3.3. von Kossa - Färbung87
3.4. Färbung nach Giemsa88
3.5. Hämatoxylin-Eosin-Färbung88
4. Färbungen an Methacrylatschnitten von unentkalkten Knochenbiopsien88
5. Fluoreszenz-Markierung in Knochen88
6. Autoradiografie89
7. Kontaktradiografie89
8. Histomorphometrische Methoden am unentkalkten Knochen89
D Makroskopische Begutachtung – Vom Fläschchen in die Kassette91
Einbettungsprozess95
A. Paraffinwachseinbettung97
1. Nachbehandlung nach Formalin-Fixierung97
2. Beispiel eines Einbettungsprotokolls97
3. Faktoren des Einbettungsprozesses98
3.1. Prinzip98
3.2. Gewebe98
3.3. Reagenzien98
3.4. Prozessbedingungen99
4. Arbeitsschritte100
5. Automation103
6. Ausgießen, Einblocken (Embedding)106
7. Tissuearray (Multigewebeblock)109
B. Gelatine-Einbettung111
C. Agar-Einbettung112
D. Celloidin-Einbettung (Nitrocellulose)113
E. Polyethylenglykol-Einbettung (PEG)114
F. Polyesterwachs-Einbettung115
G. Kunststoff-Einbettung116
H. Übersicht - Processing-Reagenzien128
Mikrotomie132
A. Einbettmedien - Schnittdicken133
B. Mikrotom134
C. Mikrotommesser141
D. Schneidetechnik146
E. Anhaften der Schnitte am Objektträger161
F. Laser Capture Microdissection (LCM)166
Histologische Färbung168
A. Geschichtliches170
B. Farbstoffe171
C. Färbetheorie179
D. Vorbehandlung188
E. Färbeprotokolle189
F. Übersichtsfärbung: Hämatoxylin – Eosin – Färbung192
G. Spezialfärbungen198
H. Bindegewebe- und Stützgewebe-Darstellung204
K. Amyloid-Darstellung222
M. Mikroorganismen-Darstellung230
N. Darstellung neurologischer Strukturen233
O. Nukleinsäuren-Darstellung236
P. Darstellung von biogenen Aminen237
Q. Darstellung funktioneller Gruppen238
S. Nachbehandlung der Schnitte239
T. Färbeautomaten242
U. Färbung in der Elektronenmikroskopie244
Enzymhistochemie246
A. Enzyme247
B. Indikationen248
C. Fixierung248
D. Nachweisprinzip249
E. Phosphatasen253
F. Esterasen255
G. Oxidoreductasen258
Immunhistochemie266
A. Prinzip267
B. Anwendung der Immunhistochemie268
C. Antikörper269
D. Begriffe277
E. Fixierung, Processing, Schneiden in der Immunhistologie279
F. Antigen-Demaskierung281
G. Methoden284
H. Amplifikationsmethoden292
K. Bearbeitung von zytologischem Material und Gefrierschnitten299
L. Protokoll-Beispiel für LSAB-Methode300
M. Automation301
In Situ Hybridisierung304
A. Anwendungen305
B. Prinzip307
C. Ablauf311
D. Automation318
E. In-situ-PCR319
F. Extraktion von Nukleinsäuren aus fixiertem Gewebe319
G. Microarrays321
H. Begriffe324
Zellkultur328
A. Technik329
B. Anwendungsbeispiele337
C. Gewebe- und Organkulturen339
D. Begriffe340
Mikrowellentechnik342
A. Mikrowellen-Physik343
B. Faktoren der Energieaufnahme344
D. Mikrowellenherde346
E. Praktisches Arbeiten mit Mikrowellen348
F. Anwendungen349
Mikroskopie353
A. Hellfeldmikroskop354
B. Dunkelfeldmikroskop355
C. Phasenkontrastmikroskop355
D. Interferenzkontrastmikroskop355
E. Polarisationsmikroskop356
F. Fluoreszenzmikroskop356
G. Konfokales Raster-Lasermikroskop356
H. Stereomikroskop357
I. Elektronenmikroskop357
J. Digitale Bildgebung361
Qualitätssicherung im Labor363
A. Projekt364
B. Produkt367
C. Prozesse369
D. Projektteam370
E. Dokumente373
F. Faktor Mensch374
G. Begriffe375
Sicherheit im histologischen Labor380
A. Chemische Arbeitsstoffe382
B. Biologische Arbeitsstoffe394
C. Wohlfühlfaktor am Arbeitsplatz396
D. Gesetzliche Richtlinien397
E. Aufstellung von Chemikalien im Histolabor399
Geschichte der histologischen Technik415
A. Zeittabelle416
Quellen423
Abkürzungen420
Bildnachweis431
Sachverzeichnis432

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